2025-03-29 05:08:37
使用10×MOPSRNA緩沖液進行RNA電泳后,染色和檢測是關鍵步驟,以下是詳細的染色和檢測流程:1.電泳完成:-確保RNA樣品已經在瓊脂糖凝膠中完成電泳,RNA條帶已經形成。2.染色:-染色劑選擇:常用的核酸染料包括溴乙錠(EthidiumBromide,EtBr)和SYBRGreen。EtBr是一種熒光染料,可以與核酸分子結合,使其在紫外光下發(fā)出熒光;SYBRGreen也是一種熒光染料,但比EtBr更**,毒性較低。-染色方法:-EtBr染色:將凝膠浸入含有0.5-2.0μg/mLEtBr的1×TAE或1×TBE緩沖液中,染色10-30分鐘。注意EtBr具有毒性,操作時應佩戴手套和防護眼鏡。-SYBRGreen染色:將凝膠浸入含有1:10000稀釋的SYBRGreen溶液中,染色10-30分鐘。3.去染色劑:-染色完成后,將凝膠從染色劑中取出,用1×MOPS緩沖液或其他適當的緩沖液輕輕沖洗,去除多余的染色劑。4.檢測:-紫外光照射:將染色后的凝膠放置在紫外光照射箱中,使用紫外光源照射凝膠。-觀察和記錄:在紫外光下觀察RNA條帶,使用凝膠成像系統或紫外光相機記錄電泳結果。RNA條帶會發(fā)出明亮的熒光,便于觀察和分析。Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)適用于多種類型的血液樣本,包括全血、血漿和血清等。上海重組蛋白定制服務技術服務
甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×):高效、穩(wěn)定的核酸電泳緩沖液甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×)是一種為核酸電泳設計的高效緩沖液,廣應用于甲基氫氧化汞電泳實驗中。該緩沖液的主要成分包括500 mM硼酸、50 mM硼酸鈉和硫酸鈉,pH值約為8.1。產品特點高效分離:甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×)在稀釋為1×工作液后,能夠提供穩(wěn)定的pH環(huán)境和離子強度,特別適合分離小片段核酸。穩(wěn)定性高:該緩沖液以10倍濃縮的形式提供,儲存和使用過程中更加穩(wěn)定,適合長期保存。兼容性強:適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView),滿足不同實驗需求。使用方法稀釋緩沖液:使用時需將10×甲基汞凝膠電泳緩沖液用蒸餾水或去離子水稀釋至1×工作液。制備凝膠:將瓊脂糖溶解于1×緩沖液中,加熱熔化后冷卻至55℃,加入甲基氫氧化汞,使其終濃度為5 mmol/L。電泳操作:將樣品加入凝膠孔中,使用1×緩沖液進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用合適的核酸染料對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。保存與注意事項保存條件:甲基汞凝膠電泳緩沖液(10×)應保存在室溫下,避免長時間暴露在高溫或強光下。使用期限:未開封的產品有效期為12個月。天津純化工藝服務技術服務開發(fā)高效分離:TAE緩沖液在低濃度下具有較低的離子強度,適合分離大分子量的DNA片段。
Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free):RNA電泳的可靠選擇Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)是一種為RNA電泳設計的緩沖液,廣應用于分子生物學實驗中。其主要成分包括450 mM Tris-硼酸、10 mM EDTA和DEPC處理水。這種配方經過特殊處理,確保無RNase污染,能夠有效保護RNA樣品免受降解。產品特點與優(yōu)勢無RNase污染:該緩沖液經過DEPC處理,確保無RNase污染,適用于RNA電泳。高效分離:TBE緩沖液的緩沖能力較弱,適合分離小于2000 bp的DNA或RN片段。兼容性強:適用于多種類型的瓊脂糖凝膠電泳,兼容常見的核酸染料(如EB或GoldView)。穩(wěn)定性高:5×TBE濃縮液比10×TBE更穩(wěn)定,不易產生沉淀,適合長期儲存。使用方法稀釋緩沖液:使用時需用DEPC處理水或其他RNase-free的純水將5×TBE稀釋為0.5×TBE或1×TBE工作液。制備凝膠:用稀釋后的TBE緩沖液制備瓊脂糖凝膠。電泳操作:將RNA樣品加入凝膠孔中,使用稀釋后的TBE緩沖液進行電泳。染色與觀察:電泳結束后,使用RNase-free的核酸染料對凝膠進行染色,并在紫外透射儀下觀察結果。保存與注意事項保存條件:Tris-硼酸電泳緩沖液(5×TBE, RNase free)應保存在室溫或4℃條件下,避免長時間暴露在高溫或強光下。
TaqPCRMasterMix的便捷性TaqPCRMasterMix為實驗人員提供了極大的便捷,它是預混好的試劑,包含了Taq酶、dNTPs、緩沖液和鎂離子等PCR所需的關鍵成分,只需加入模板和引物即可進行反應。這簡化了實驗準備過程,減少了因人為配制試劑產生的誤差和污染風險,無論是初學者還是經驗豐富的研究人員,都能快速上手,尤其適用于高通量的PCR實驗,如大規(guī)模的基因篩查項目,提高了實驗室的工作效率。TaqPCRMasterMix的高特異性其具有高特異性,能精細地識別目標DNA序列并進行擴增,有效避免非特異性擴增產物的出現。這得益于質量的Taq酶和優(yōu)化的反應緩沖液體系,它們共同作用,使得引物能夠準確地與模板結合,擴增出預期的DNA片段。在病原體檢測等領域,高特異性至關重要,能夠準確地鑒定出微量樣本中的病原體核酸,避免假陽性結果,為臨床診斷提供可靠依據,保障患者的診斷準確性和及時性。Taq PCR Master Mix (2×) 的優(yōu)勢在于其高度優(yōu)化的配方和高質量的組分。該預混液含有高活性的Taq DNA聚合酶。
在實驗室中使用Thioredoxin-NP-27腸激酶底物時,應遵循以下步驟:1.稀釋底物:首先,使用反應緩沖液(ReactionBuffer)將Thioredoxin-NP-27稀釋至0.1mg/ml。2.準備反應體系:取數個離心管,每個管中加入40μL稀釋后的Thioredoxin-NP-27溶液。3.添加腸激酶:然后,根據實驗設計,向每個離心管中加入不同量的腸激酶溶液,例如0μL、2μL、3μL等,以評估不同酶量對底物的切割效果。4.補充反應緩沖液:根據加入的腸激酶溶液量,相應減少反應緩沖液的量,以保持總體積不變。5.進行酶切反應:將離心管置于37℃±0.5℃水浴中,反應16小時。6.終止反應:反應結束后,向每個反應管中加入50μL的2×SDS凝膠加樣緩沖液,以終止酶切反應。7.電泳分析:取出各反應液20μL,進行SDS-PAGE凝膠電泳,以觀察酶切效果。8.計算腸激酶活性:根據GB/T41907-2022標準,按照提供的公式計算腸激酶活性,單位為腸激酶活性單位每毫克蛋白或固含物(U/mg)。9.保存條件:Thioredoxin-NP-27應在-30~-15℃保存,運輸時溫度應≤0℃。在電泳過程中,1×TAE能夠提供穩(wěn)定的電流和電壓條件,確保DNA片段在凝膠中均勻遷移。北京畢赤酵母表達服務技術服務開發(fā)
DNA Marker I是一種即用型產品,已預混1×Loading Buffer,可直接取5-10 μL用于電泳,無需額外處理。上海重組蛋白定制服務技術服務
DL100:助力分子生物學實驗的高效工具在分子生物學研究中,DNA Marker是實驗室中不可或缺的工具之一,它用于幫助研究人員快速、準確地分析DNA片段的大小。DL100 DNA Marker作為一款經典的分子量標準,憑借其精細的條帶分布和便捷的操作,為實驗人員提供了可靠的參考。DL100 DNA Marker是一種即用型的DNA分子量標準,已預混Loading Buffer,可直接用于瓊脂糖凝膠電泳。它包含一系列已知長度的雙鏈DNA片段,覆蓋從100 bp到10,000 bp的范圍,具體條帶大小通常為100 bp、200 bp、500 bp、1,000 bp、2,000 bp、5,000 bp和10,000 bp。其中,部分條帶(如1,000 bp或5,000 bp)會加亮顯示,便于快速定位和半定量分析。在實驗中,DL100 DNA Marker的條帶清晰、亮度均勻,能夠為研究人員提供準確的分子量參考。它不僅適用于常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳,還可用于非變性PAGE膠的分析,進一步拓展了其應用場景。此外,DL100的保存條件非常靈活,可在2-8℃保存3-6個月,長期保存則建議置于-20℃,避免反復凍融即可。DL100 DNA Marker的使用也非常方便。推薦上樣量為5-10 μL,適用于1%-3%的瓊脂糖凝膠濃度。上海重組蛋白定制服務技術服務