2025-04-19 02:07:00
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動(dòng)了基因擴(kuò)增、測(cè)序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時(shí)在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個(gè)突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來,科學(xué)家們通過對(duì)Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長(zhǎng)片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測(cè)技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測(cè)多個(gè)靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡(jiǎn)化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測(cè)和個(gè)性化**等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。熱啟動(dòng)技術(shù)有效抑制了非特異性擴(kuò)增,使得Hot-Start Taq DNA Polymerase在低拷貝數(shù)模板檢測(cè)中表現(xiàn)出色。Recombinant Human TRAIL R1/DR4/TNFRSF10A Protein,hFc Tag
5× RNA Loading Buffer:RNA電泳中的關(guān)鍵試劑5× RNA Loading Buffer 是一種為RNA凝膠電泳設(shè)計(jì)的即用型試劑,廣泛應(yīng)用于RN片段的分離和分析。它通過添加特定的染料和高密度成分(如甘油或蔗糖),使RNA樣品在電泳過程中更容易沉降并被觀察,是RNA研究中不可或缺的工具。產(chǎn)品特點(diǎn)高密度與染料標(biāo)記:5× RNA Loading Buffer 含有高濃度的甘油或蔗糖,能夠使RNA樣品在電泳時(shí)沉降于凝膠孔底部,避免漂浮。同時(shí),其中的染料(如溴酚藍(lán)或二甲苯藍(lán))可以指示RNA遷移的位置,便于實(shí)時(shí)觀察電泳進(jìn)程。即用型設(shè)計(jì):無需額外配制,直接與RNA樣品混合即可使用,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。兼容性強(qiáng):適用于多種類型的RNA樣品,包括總RNA、mRNA、小RNA等,也兼容瓊脂糖凝膠和聚丙烯酰胺凝膠電泳。穩(wěn)定保存:常溫保存,穩(wěn)定性高,無需特殊處理。應(yīng)用場(chǎng)景RN片段分離:在瓊脂糖凝膠電泳中,用于分離和分析RN片段,如轉(zhuǎn)錄本大小分析、RNA降解產(chǎn)物檢測(cè)等。電泳指示:染料的遷移速率可以作為RN片段大小的參考,幫助判斷目標(biāo)片段的位置。RNA回收:在RNA回收實(shí)驗(yàn)中,幫助定位目標(biāo)條帶,便于后續(xù)的切膠回收操作。Recombinant Human TRAIL R1/DR4/TNFRSF10A Protein,hFc Tag使用 Tn5 轉(zhuǎn)座酶可以保證 DNA的 片段化的質(zhì)量,同時(shí)獲得的蛋白純度高、核酸殘留低,能夠?yàn)楹罄m(xù)的實(shí)驗(yàn)。
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus):高效、特異且防污染的RNA定量檢測(cè)解決方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 是一種為RNA模板設(shè)計(jì)的一步法實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)試劑盒,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和UDG防污染系統(tǒng),能夠在同一反應(yīng)管中完成逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng),操作簡(jiǎn)便且高效。產(chǎn)品特點(diǎn)高靈敏度與特異性:采用優(yōu)化的逆轉(zhuǎn)錄酶和熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶,結(jié)合SYBR Green I染料,能夠高效檢測(cè)低豐度RNA模板,同時(shí)減少非特異性擴(kuò)增。UDG防污染系統(tǒng):含有dUTP和UDG酶,可在反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,有效防止氣溶膠污染。操作簡(jiǎn)便:逆轉(zhuǎn)錄和qPCR反應(yīng)在同一管中完成,減少了操作步驟和污染風(fēng)險(xiǎn)。兼容性強(qiáng):適用于多種qPCR儀器,支持快速反應(yīng)程序。應(yīng)用場(chǎng)景基因表達(dá)分析:用于定量檢測(cè)特定基因的表達(dá)水平。病毒檢測(cè):適用于RNA病毒的快速檢測(cè),如流感病毒、病毒等。高通量樣本分析:適合多樣本的單基因檢測(cè)。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點(diǎn),成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測(cè)中的重要工具,尤其適用于需要快速、準(zhǔn)確檢測(cè)RNA樣本的場(chǎng)景。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與高質(zhì)量dNTPMix(25mMeach)采用高純度原料,每種核苷酸(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)的濃度均為25mM,純度≥99%(HPLC檢測(cè)),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。此外,產(chǎn)品經(jīng)過嚴(yán)格檢測(cè),不含DNase、RNase和核酸外切酶,避免了核酸降解的風(fēng)險(xiǎn)。穩(wěn)定性和兼容性該產(chǎn)品在-20°C下可穩(wěn)定保存至少12個(gè)月,且在常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的兼容性,適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和高保真酶。操作便捷性dNTPMix為預(yù)混溶液,減少了多次移液帶來的誤差,提高了實(shí)驗(yàn)效率。此外,產(chǎn)品可以直接用于PCR、cDNA合成等實(shí)驗(yàn),無需額外處理。二、性能表現(xiàn)高效擴(kuò)增能力在PCR實(shí)驗(yàn)中,dNTPMix(25mMeach)能夠支持長(zhǎng)片段DNA的高效擴(kuò)增。例如,使用高保真酶時(shí),可輕松擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)20kb的DNA片段。這種高效性使其在基因克隆和復(fù)雜模板擴(kuò)增中表現(xiàn)出色。靈敏度與特異性dNTPMix在qPCR實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,靈敏度可達(dá)到單拷貝水平。此外,其高純度和低雜質(zhì)含量減少了非特異性擴(kuò)增的可能性,提高了實(shí)驗(yàn)的特異性和重復(fù)性。與一些其他 DNA 聚合酶不同,T4 DNA 聚合酶不具有 5’→3’外切酶活性,不會(huì)對(duì) DNA 鏈的 5’端進(jìn)行切割和修飾。
高密度設(shè)計(jì),確保樣品沉降6×DNALoadingBuffer是一種六倍濃縮的上樣緩沖液,其主要成分包括甘油或蔗糖等高密度物質(zhì)。這些成分能夠增加樣品的密度,使DNA樣品在加樣后能夠迅速沉入瓊脂糖凝膠的加樣孔底部,避免樣品漂浮,從而確保電泳過程的順利進(jìn)行。雙色指示劑,直觀監(jiān)控電泳進(jìn)程該緩沖液通常含有兩種示蹤染料——溴酚藍(lán)和二甲苯青。溴酚藍(lán)的遷移速度接近300bp的雙鏈DNA,而二甲苯青的遷移速度則接近4-5kb的雙鏈DNA。通過觀察這兩種染料的遷移情況,研究人員可以直觀地判斷電泳的進(jìn)程,從而避免電泳時(shí)間過長(zhǎng)或不足。穩(wěn)定樣品,防止降解6×DNALoadingBuffer中還含有EDTA等成分,能夠螯合鎂離子,防止核酸酶對(duì)DNA的降解,從而保護(hù)DNA樣品的完整性。此外,其配方優(yōu)化后,能夠在電泳過程中維持DNA的穩(wěn)定狀態(tài),確保電泳結(jié)果的可靠性。兼容性強(qiáng),適用范圍廣6×DNALoadingBuffer適用于多種類型的核酸電泳,包括瓊脂糖凝膠電泳和非變性丙烯酰胺凝膠電泳。其優(yōu)化的配方使其在不同濃度的瓊脂糖凝膠中均能表現(xiàn)出良好的性能,且與常見的電泳緩沖液(如TAE和TBE)完全兼容。在50 μL的反應(yīng)體系中,建議使用1.5 μL的5× PCR Enhancer(如果需要)和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase。Recombinant Human TRAIL R1/DR4/TNFRSF10A Protein,hFc Tag
該預(yù)混液能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)5 kb的DNA片段,并且對(duì)不同抗凝劑處理的血液樣本均表現(xiàn)出良好的兼容性。Recombinant Human TRAIL R1/DR4/TNFRSF10A Protein,hFc Tag
Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(5U/?l):高效除PCR污染的關(guān)鍵酶在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)的應(yīng)用極為廣,但PCR產(chǎn)物的交叉污染問題一直是影響實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵因素之一。Uracil-DNAGlycosylase(E.coli)(UDG)作為一種高效的酶工具,憑借其獨(dú)特的性能和廣的應(yīng)用,已成為解決這一問題的理想選擇。一、產(chǎn)品特點(diǎn)高效水解尿嘧啶Uracil-DNAGlycosylase(UDG)能夠特異性地催化DNA中尿嘧啶(dU)堿基與脫氧核糖之間的N-糖苷鍵水解,釋放游離尿嘧啶。這種酶對(duì)單鏈和雙鏈DNA均有效,但對(duì)RNA或長(zhǎng)度不超過6個(gè)堿基的DNA寡核苷酸無活性。防止PCR產(chǎn)物污染UDG的主要應(yīng)用之一是防止PCR產(chǎn)物的交叉污染。通過在PCR反應(yīng)中使用dUTP替代dTTP,生成含有dU的PCR產(chǎn)物,UDG可以特異性地切割這些含有dU的DNA,從而防止其在后續(xù)反應(yīng)中作為模板被擴(kuò)增。反應(yīng)條件兼容性UDG在pH8.0左右表現(xiàn)出活性,且不需要二價(jià)陽(yáng)離子,可在較寬的pH范圍內(nèi)工作。它對(duì)高離子強(qiáng)度(>200mM)敏感,因此在使用時(shí)需注意反應(yīng)體系的離子濃度。Recombinant Human TRAIL R1/DR4/TNFRSF10A Protein,hFc Tag